不同茶类抗烟毒诱发细胞微核率的效果

1.2.2　蚕豆根尖制备　洗净蚕豆种子，置28 ℃培养箱内用蒸馏水浸种催芽，24 h后置于铺有湿纱布的托盘内，在28 ℃下培养3 d，待根长至2～3 cm时备用.

1.2.3　染毒、修复　选发育良好、根长一致的蚕豆幼苗插入有孔的培养板中，置于各试验处理溶液（将烟雾水溶液加热至沸，添加各茶类，水浴15 min后冷却用于试验）中，使根尖完全浸入，28 ℃下培养6 h后用蒸馏水清洗根尖2次，再换入新鲜蒸馏水修复培养22 h.

1.2.4　固定保存　切取处理好的根尖，用新配的卡诺氏固定液（无水乙醇∶冰乙酸＝3∶1）固定24 h后转入体积分数为0.70酒精，置于4 ℃冰箱保存备检.

1.2.5　染色与观察统计　取固定好的根尖，用1 mol.L-1 HCl在60 ℃下水解15 min，后经Schiff试剂染色，制片镜检，每组至少观察5个根尖，每个根尖至少计数1000个细胞，计算蚕豆根尖细胞微核千分率，并进行统计分析.

1.2.6　内含物测定　茶多酚含量由酒石酸亚铁分光光度法测定，儿茶素含量由香荚兰素比色法测定.

2　结果与分析
2.1　不同茶类对香烟烟雾水溶物诱变作用的影响
　　蚕豆根尖细胞微核率检测的结果表明,在香烟烟雾水溶液中添加不同茶类之后，其细胞微核率比对照明显下降(表1).t检验t0,1～t0,8表明,处理1至处理8微核率下降均达极显著水平(表2)，说明各种茶叶均有明显抗烟毒效果.

表1　试验处理及细胞微核率统计1)
　Table 1　Treatment and cellular micronuclei frequency

处理序号 茶类 茶叶用量 微核率/‰
(平均值±标准差)
g
0(CK) 无 0
41.08±1.34
1 乌龙茶 5 14.14±1.21
2 乌龙茶 2.5 20.84±1.08
3 绿茶 5 12.94±1.71
4 绿茶 2.5 19.59±2.01
5 红茶 5 19.88±0.91
6 红茶 2.5 22.68±0.77
7 白茶 5 19.31±1.56
8 白茶 2.5 23.11±1.09

1)各处理用烟量均为每250 mL蒸馏水中含2支香烟烟雾水溶物.

表2　各处理之间微核率的t检验1)
Table 2　t-test of micronuclei frequency in every treatment

比较项 t值 比较项 t值 比较项 t值 比较项 t值
t0,1 33.49**
t1,3 1.37
t2,4 1.23
t1,2 9.26**

t0,2 26.38** t1,5 8.51** t2,6 3.11* t3,4 5.63**
t0,3 29.01** t1,7 5.87** t2,8 3.31* t5,6 4.70*
t0,4 19.92** t3,5 8.02** t4,6 3.21* t7,8 4.47*
t0,5 29.39** t3,7 6.16** t4,8 3.44*
t0,6 26.71** t5,7 0.71 t6,8 0.72
t0,7 23.75**
t0,8 23.33**

1)*、**分别表示差异达显著、极显著水平.

　　比较各茶类抗烟毒效果的差异，绿茶、乌龙茶优于红茶、白茶，其t值t1,5、t1,7、t3,5、t3,7与t2,6、t2,8、t4,6、t4,8差异达极显著或显著水平.而t1,3、t5,7与t2,4、t6, 8之间差异不显著,说明绿茶、乌龙茶与红茶、白茶之间的抗烟毒效果差异较多；而绿茶与乌龙茶之间，红茶与白茶之间无明显差异.从微核率均值看，不同茶类抗烟毒效果为绿茶＞乌龙茶＞白茶＞红茶.
2.2　不同茶水比对抗烟毒诱变作用的影响

　　选用1∶50、1∶100等2种茶水比作为本试验茶水比处理.试验结果表明，1∶50茶水比各处理其抑制香烟烟雾水溶物诱发产生微核率的效果优于1∶100茶水比处理.表2中, t1,2、t3,4表明乌龙茶与绿茶2种茶水比抗烟毒效果差异达极显著水平，而t5,6、t7,8表明红茶与白茶的2种不同茶水比抗烟毒差异仅为显著水平.从t1,5、t1,7、t3,5、t3,7看, 1∶50茶水比的抗烟效果，乌龙茶与红茶、白茶,绿茶与红茶、白茶之间的差异均达极显著,而1∶100茶水比的t2,6、t2,8、t4,6、t4,8之间差异只为显著，同样说明1∶50茶水比抗烟毒效果强于1∶100茶水比(表2).从微核率均值上看1∶50茶水比红茶、白茶的降低细胞微核率效果只相当于1∶100茶水比的绿茶与乌龙茶.
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